根据相关规定,大客车在凌晨2点到5点之间不能在高速公路上行驶。这是因为为了保证乘客的安全,夜间在道路上(包括高速公路和混合道路)行驶的客运车辆必须在凌晨2点至5点之间就近停靠在安全地带,落地休息。同时,驾驶员也需要提醒乘客不要随意走动,照看好随身携带的物品。如果有需求,乘客应及时联系驾驶员。
这一规定是根据《道路旅客运输企业安全管理规范》第38条所规定的。客运企业不得要求客运驾驶员违反驾驶时间和休息时间等规定驾驶客运车辆,而应主动查处客运驾驶员违反驾驶时间和休息时间等规定的行为。如果发现客运驾驶员违反驾驶时间和休息时间等规定驾驶客运车辆,应及时采取措施纠正。